直接觀察法 發情開始后12-18小時，接受其它牛爬跨，由煩躁轉為安靜；粘液量少，渾濁狀或透明而濃稠。
陰道檢查法 外陰腫脹開始消失，子宮頸口呈大蒜瓣狀、粉紅或帶紫褐、濕潤、開張良好。
直腸檢查法 通過直腸檢查觸摸兩側卵巢上的卵泡發育情況來確定母牛是否發情，根據卵泡是否突出于卵巢表面及大小、彈性、波動性和排卵來判斷是否發情及配種或輸精的適期。發情初期卵巢有所增大，卵泡部分突出于卵巢表面，其直徑在0.8厘米以下，較硬；到卵泡成熟期，卵泡呈球狀突出于卵巢表面，其直徑可達1-2.4厘米，卵泡壁變薄，富有彈性，有一觸即破之感。同時，觸摸子宮角后，子宮有收縮 （緊張）感。卵巢上有直徑在1.5厘米左右的卵泡，并有一觸即破之感。
